【案例分析】甘油三酯20多,竟然是它干扰了......

作者：山西大医院检验科 公志华

审稿：山西大医院检验科 杨云

【事件经过】 

一天，在审核生化报告的过程中，一例血脂四项的结果引起了我的注意，患者CHO、HDL、LDL结果均正常，而TG测定结果为20.78 mmol/L，查阅仪器乳糜指数为“0”。患者TG异常升高，应该存在严重的脂代谢紊乱，但是血脂四项中其它指标均正常，我对此项结果充满疑惑。从生化免疫流水线的冰箱拿出原始标本，首先观察血清外观，淡黄清亮没有丝毫的乳糜，难道检测真的出了问题？抱着求证的心理，我将血清进行了3倍，5倍稀释重新进行测定，同时在另一台AU5400生化分析仪上对原始标本进行再次检测。查看当天的室内质控图，正常值和高值两个浓度的室内质控结果均在控。尽管如此，还是决定停发报告，耐心等待复查结果。经AU5800再次测定，稀释过的标本乘以稀释倍数后，最终结果分别为1.18 mmol/L和1.21 mmol/L，AU5400检测原始标本结果为：1.19 mmol/L。这三个结果一致，却与第一次的检测结果出现了巨大的差异，产生如此差异的原因究竟是什么？

【问题查找思路】 

首先查看了该标本的反应曲线，当目睹如下的反应曲线时我意识到一定是出现了干扰，而且是试剂2搅拌棒引入的干扰，如图一。

图一 受干扰TG的反应曲线

 

我们检测TG使用的仪器是AU5800生化分析仪，检测TG的试剂为单试剂，但是图一在10点搅拌后反应曲线出现了明显的变化，应该是在R2搅拌棒搅拌过程中引入了反应物质。参数设置读点为0-27点，因此27点读数结果受到了明显的干扰。

图二 受干扰TG反应曲线放大图

 

将反应曲线放大如图二，发现0-10点还是标本的真实反应，10点之后经R2搅拌棒搅拌引入了新的反应物质，曲线出现了明显的干扰。由0-10点反应曲线计算结果：0-10点根据终点法计算吸光度=（0.1836-0.0787）-（0.0794-0.0793）=0.1048，当天采用的校正曲线因数为10.93，计算结果为1.15mmol/L。AU5400重新检测结果为1.19 mmol/L，与计算一致。综上所述，干扰是10点后产生的。

为了找到干扰源，我们观察受干扰TG所在的单元，内外圈以及所用的搅拌棒，发现所用的反应杯和搅拌棒组合并不固定。检索与受干扰TG检测同在2单元内圈，使用同一组搅拌棒2-3-2组合所做的前一个项目为与TG同厂家试剂测定的HCY，如图三。再检索受干扰TG使用搅拌棒3-1-3组合的前一个项目仍为HCY，如图四和图五。进一步检索当日受干扰的TG，使用同一套搅拌系统的前一个项目均为HCY，而前一个测试项目不是HCY的TG均未发生干扰。

图三 使用搅拌棒2-3-2组合所做的HCY的反应曲线

 

图四 使用搅拌棒3-1-3组合后受干扰TG的反应曲线 

图五 使用搅拌棒3-1-3组合所做的HCY的反应曲线

 

为进一步验证推测结果，我们联系了该试剂的工程师，在工程师的帮助下我们共同检测该HCY试剂中的TG含量，结果如下：

1、HCY双试剂R1和R2按比例混合测定TG，结果为15.44mmol/L；

2、HCY双试剂R2测定TG，结果为：34.17mmol/L；

3、HCY三试剂R3测定TG，结果为：35.04mmol/L。

该厂家HCY试剂有两种规格：一种为双试剂，一种为三试剂，经检测两种试剂都含有TG。又一个问题出现了，为什么我们使用三试剂HCY多年，却从未出现干扰呢？

仔细分析，发现1月23日HCY试剂由三试剂变更为双试剂时在仪器上设置为2单元内圈检测，而以往HCY三试剂在仪器上设置为2单元外圈，所以在使用三试剂时未出现干扰。而使用设置在内圈的双试剂检测标本后，对同圈检测的TG构成了干扰，前期在性能验证时因没和大批量标本共同检测，所以未发现问题。经过与临床大夫积极沟通，在临床尚未发现问题的情况下及时更正了错误结果，未对患者造成影响。我们通过严谨的工作态度，及时发现问题，并主动与临床医生说明情况，更正错误结果，最终赢得了临床医生和患者的谅解。

【心得体会】 

一、在厂家工程师的积极帮助下我们确认了该HCY试剂含有高浓度的TG，在使用过程中为避免与TG产生交叉污染，请勿设置在同一反应圈中。

二、当生化检测室内质控在控时，并不能代表所有的检测结果一定没问题，要警惕干扰的发生。当出现干扰时，我们可从反应杯，搅拌棒等共用部分着手寻找规律，从而发现真正的原因。

三、在全自动生化分析仪的使用过程中，不仅要熟练掌握各检测项目的原理和方法，还需要对检测项目排序进行合理设置，做好交叉污染的防控措施，以确保检测结果的准确性。